原(yuan)理(li)：
酶(mei)標(biao)(biao)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)法(fa)，又(you)名酶(mei)聯免疫(yi)(yi)吸附法(fa)（ELISA），利用酶(mei)標(biao)(biao)記抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)或(huo)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)以檢(jian)測(ce)相(xiang)應(ying)(ying)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)或(huo)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)的(de)一種免疫(yi)(yi)學標(biao)(biao)記技術。其(qi)基本(ben)(ben)原(yuan)(yuan)理是使(shi)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)或(huo)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)結(jie)(jie)合(he)到某種固(gu)相(xiang)載體(ti)(ti)表面(mian)，并保(bao)持其(qi)免疫(yi)(yi)活性(xing)(xing)(xing)，而相(xiang)對(dui)應(ying)(ying)的(de)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)或(huo)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)與某種酶(mei)連接成(cheng)酶(mei)標(biao)(biao)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)或(huo)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)，酶(mei)標(biao)(biao)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)或(huo)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)既(ji)保(bao)留了(le)免疫(yi)(yi)活性(xing)(xing)(xing)可(ke)以與固(gu)相(xiang)載體(ti)(ti)表面(mian)的(de)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)或(huo)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)結(jie)(jie)合(he)，又(you)保(bao)留了(le)酶(mei)活性(xing)(xing)(xing)能(neng)夠以酶(mei)為檢(jian)測(ce)信號，加(jia)入(ru)酶(mei)反(fan)應(ying)(ying)的(de)底物(wu)(wu)(wu)后，底物(wu)(wu)(wu)被酶(mei)催(cui)化為有色產(chan)物(wu)(wu)(wu)，產(chan)物(wu)(wu)(wu)的(de)量(liang)與受檢(jian)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)或(huo)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)的(de)量(liang)成(cheng)比(bi)例(li)，故可(ke)根據顏色深淺(qian)來定(ding)(ding)性(xing)(xing)(xing)或(huo)定(ding)(ding)量(liang)分析。酶(mei)標(biao)(biao)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)法(fa)具有靈敏性(xing)(xing)(xing)強，特異(yi)性(xing)(xing)(xing)高，重復性(xing)(xing)(xing)好，檢(jian)測(ce)速度快(kuai)的(de)特點，尤其(qi)適用于大批(pi)量(liang)樣(yang)本(ben)(ben)檢(jian)測(ce)，是國際認(ren)可(ke)的(de)標(biao)(biao)準(zhun)化診斷方(fang)法(fa)。
基本操作步(bu)驟(zou)：
包被—封閉—加樣—孵育一抗—洗(xi)滌(di)—孵育二抗—洗(xi)滌(di)—顯色—終(zhong)止(zhi)—讀數
分類：
依據檢測目的不同，酶標抗體(ti)法(fa)(fa)有(you)間接(jie)法(fa)(fa)，雙抗體(ti)夾心法(fa)(fa)，競爭法(fa)(fa)和(he)抗體(ti)捕獲(huo)法(fa)(fa)等。
主要(yao)是(shi)利用(yong)酶標(biao)記的(de)抗(kang)(kang)(kang)抗(kang)(kang)(kang)體(ti)檢測已與固相結合的(de)受檢抗(kang)(kang)(kang)體(ti)，是(shi)檢測抗(kang)(kang)(kang)體(ti)常用的(de)(de)方(fang)法。將特(te)異(yi)性抗(kang)(kang)(kang)原(yuan)與固(gu)相(xiang)載體(ti)(ti)連接，形(xing)成(cheng)固(gu)相(xiang)抗(kang)(kang)(kang)原(yuan)，洗(xi)(xi)滌除去(qu)未結(jie)合(he)(he)的(de)(de)抗(kang)(kang)(kang)原(yuan)及雜質。加(jia)入稀釋的(de)(de)受檢樣品(pin)（如血清），樣品(pin)中特(te)異(yi)性抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)與抗(kang)(kang)(kang)原(yuan)結(jie)合(he)(he)，形(xing)成(cheng)固(gu)相(xiang)抗(kang)(kang)(kang)原(yuan)抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)復(fu)合(he)(he)物(wu)。經洗(xi)(xi)滌后(hou)固(gu)相(xiang)載體(ti)(ti)上(shang)(shang)只留下特(te)異(yi)性抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)。其他免(mian)疫球蛋白及雜質由于不能與固(gu)相(xiang)抗(kang)(kang)(kang)原(yuan)結(jie)合(he)(he)，在洗(xi)(xi)滌過程(cheng)中被洗(xi)(xi)去(qu)。加(jia)入酶(mei)(mei)標抗(kang)(kang)(kang)抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)與固(gu)相(xiang)復(fu)合(he)(he)物(wu)中的(de)(de)抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)結(jie)合(he)(he)，從而使該抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)間(jian)接地(di)標記上(shang)(shang)酶(mei)(mei)。洗(xi)(xi)滌后(hou)固(gu)相(xiang)載體(ti)(ti)上(shang)(shang)的(de)(de)酶(mei)(mei)量就代表特(te)異(yi)性抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)的(de)(de)量。最(zui)后(hou)加(jia)底(di)物(wu)顯色，依據顏(yan)色深(shen)度代表標本中受檢抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)的(de)(de)量。 檢測抗原常用的(de)方法。將特(te)異(yi)性抗(kang)體(ti)(ti)(ti)與固(gu)(gu)相(xiang)載(zai)體(ti)(ti)(ti)連接，形(xing)成固(gu)(gu)相(xiang)抗(kang)體(ti)(ti)(ti)，洗(xi)滌(di)除去(qu)未結(jie)(jie)合(he)(he)(he)(he)的(de)抗(kang)體(ti)(ti)(ti)及雜質(zhi)。加受檢標(biao)(biao)(biao)本，使(shi)之與固(gu)(gu)相(xiang)抗(kang)體(ti)(ti)(ti)接觸反應一(yi)段時間，讓標(biao)(biao)(biao)本中(zhong)的(de)抗(kang)原與固(gu)(gu)相(xiang)載(zai)體(ti)(ti)(ti)上(shang)的(de)抗(kang)體(ti)(ti)(ti)結(jie)(jie)合(he)(he)(he)(he)，形(xing)成固(gu)(gu)相(xiang)抗(kang)原復(fu)合(he)(he)(he)(he)物(wu)(wu)。洗(xi)滌(di)除去(qu)其(qi)他未結(jie)(jie)合(he)(he)(he)(he)的(de)物(wu)(wu)質(zhi)。加酶(mei)(mei)(mei)標(biao)(biao)(biao)抗(kang)體(ti)(ti)(ti)使(shi)固(gu)(gu)相(xiang)免疫復(fu)合(he)(he)(he)(he)物(wu)(wu)上(shang)的(de)抗(kang)原與酶(mei)(mei)(mei)標(biao)(biao)(biao)抗(kang)體(ti)(ti)(ti)結(jie)(jie)合(he)(he)(he)(he)，洗(xi)滌(di)未結(jie)(jie)合(he)(he)(he)(he)的(de)酶(mei)(mei)(mei)標(biao)(biao)(biao)抗(kang)體(ti)(ti)(ti)，此時固(gu)(gu)相(xiang)載(zai)體(ti)(ti)(ti)上(shang)帶有(you)的(de)酶(mei)(mei)(mei)量與標(biao)(biao)(biao)本中(zhong)受檢物(wu)(wu)質(zhi)的(de)量正相(xiang)關。夾心式(shi)復(fu)合(he)(he)(he)(he)物(wu)(wu)中(zhong)的(de)酶(mei)(mei)(mei)催化底(di)物(wu)(wu)成為有(you)色(se)產物(wu)(wu)。根據(ju)顏色(se)反應的(de)程度進行(xing)該(gai)抗(kang)原的(de)定(ding)性或定(ding)量。
可(ke)用于測(ce)定(ding)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)，也可(ke)用于測(ce)定(ding)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)。以(yi)測(ce)定(ding)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)為(wei)例，受檢抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)和酶(mei)(mei)(mei)(mei)標(biao)(biao)(biao)(biao)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)競(jing)爭(zheng)與(yu)(yu)(yu)固(gu)(gu)(gu)相(xiang)(xiang)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)結(jie)(jie)(jie)(jie)合(he)(he)，因(yin)此結(jie)(jie)(jie)(jie)合(he)(he)于固(gu)(gu)(gu)相(xiang)(xiang)的(de)(de)酶(mei)(mei)(mei)(mei)標(biao)(biao)(biao)(biao)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)量(liang)與(yu)(yu)(yu)受檢抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)的(de)(de)量(liang)呈反比(bi)。將特(te)異抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)與(yu)(yu)(yu)固(gu)(gu)(gu)相(xiang)(xiang)載體(ti)(ti)連接，形(xing)成固(gu)(gu)(gu)相(xiang)(xiang)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)，洗滌后加入受檢標(biao)(biao)(biao)(biao)本(ben)和一定(ding)量(liang)酶(mei)(mei)(mei)(mei)標(biao)(biao)(biao)(biao)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)的(de)(de)混合(he)(he)溶液，使之(zhi)與(yu)(yu)(yu)固(gu)(gu)(gu)相(xiang)(xiang)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)反應(ying)。如(ru)受檢標(biao)(biao)(biao)(biao)本(ben)中(zhong)無抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)，則酶(mei)(mei)(mei)(mei)標(biao)(biao)(biao)(biao)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)能(neng)順(shun)利(li)地與(yu)(yu)(yu)固(gu)(gu)(gu)相(xiang)(xiang)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)結(jie)(jie)(jie)(jie)合(he)(he)。如(ru)受檢標(biao)(biao)(biao)(biao)本(ben)中(zhong)含(han)(han)有(you)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)，則與(yu)(yu)(yu)酶(mei)(mei)(mei)(mei)標(biao)(biao)(biao)(biao)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)以(yi)同樣的(de)(de)機會(hui)與(yu)(yu)(yu)固(gu)(gu)(gu)相(xiang)(xiang)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)結(jie)(jie)(jie)(jie)合(he)(he)，競(jing)爭(zheng)性地占去了酶(mei)(mei)(mei)(mei)標(biao)(biao)(biao)(biao)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)與(yu)(yu)(yu)固(gu)(gu)(gu)相(xiang)(xiang)載體(ti)(ti)結(jie)(jie)(jie)(jie)合(he)(he)的(de)(de)機會(hui)，使酶(mei)(mei)(mei)(mei)標(biao)(biao)(biao)(biao)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)與(yu)(yu)(yu)固(gu)(gu)(gu)相(xiang)(xiang)載體(ti)(ti)的(de)(de)結(jie)(jie)(jie)(jie)合(he)(he)量(liang)減少。參考管(guan)中(zhong)只加酶(mei)(mei)(mei)(mei)標(biao)(biao)(biao)(biao)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)，孵育后酶(mei)(mei)(mei)(mei)標(biao)(biao)(biao)(biao)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)與(yu)(yu)(yu)固(gu)(gu)(gu)相(xiang)(xiang)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)的(de)(de)結(jie)(jie)(jie)(jie)合(he)(he)可(ke)達最(zui)充分的(de)(de)量(liang)。洗滌后加底(di)物(wu)顯色(se)，參考管(guan)中(zhong)由于結(jie)(jie)(jie)(jie)合(he)(he)的(de)(de)酶(mei)(mei)(mei)(mei)標(biao)(biao)(biao)(biao)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)最(zui)多，故顏色(se)最(zui)深。參考管(guan)顏色(se)深度與(yu)(yu)(yu)待測(ce)管(guan)顏色(se)深度之(zhi)差代(dai)表(biao)受檢標(biao)(biao)(biao)(biao)本(ben)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)的(de)(de)量(liang)。待測(ce)管(guan)顏色(se)越(yue)淺，表(biao)示(shi)標(biao)(biao)(biao)(biao)本(ben)中(zhong)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)含(han)(han)量(liang)越(yue)多。
血(xue)清中(zhong)針對(dui)某些抗(kang)原(yuan)的特(te)異性(xing)IgM常和特(te)異性(xing)IgG同時存在(zai)，后(hou)者會干擾IgM抗(kang)體(ti)的測(ce)(ce)定(ding)(ding)。因(yin)此測(ce)(ce)定(ding)(ding)IgM抗(kang)體(ti)多(duo)用捕(bu)獲法。先將(jiang)所有(you)血(xue)清IgM（包(bao)括異性(xing)IgM和非特(te)異性(xing)IgM）固定(ding)(ding)在(zai)固相上(shang)，去除(chu)IgG后(hou)再測(ce)(ce)定(ding)(ding)特(te)異性(xing)IgM。將(jiang)抗(kang)IgM抗(kang)體(ti)連接在(zai)固相載體(ti)上(shang)，洗滌(di)后(hou)加(jia)入(ru)(ru)稀釋的血(xue)清標(biao)本，洗滌(di)后(hou)加(jia)入(ru)(ru)特(te)異性(xing)抗(kang)原(yuan)，洗滌(di)后(hou)再加(jia)入(ru)(ru)酶(mei)標(biao)抗(kang)體(ti)，最后(hou)洗滌(di)加(jia)底物顯色。
南京(jing)億(yi)迅生物科(ke)(ke)技(ji)有(you)限(xian)公司(si)出品(pin)(pin)的各類ELISA試劑盒(he)，產品(pin)(pin)質量(liang)穩(wen)定，價格實(shi)惠，在國(guo)內各科(ke)(ke)研院所(suo)和高校擁有(you)良好的品(pin)(pin)譽。該(gai)類產品(pin)(pin)有(you)：豬α干(gan)擾素（IFI-α）ELISA試劑盒，小鼠白介素2(IL-2) ELISA試劑盒，肌鈣蛋白（CTnI）ELISA試劑盒，雞二胺氧化酶(DAO)ELISA試劑盒，小鼠(shu)腫瘤壞死因子 α（TNF-α）ELISA 檢(jian)測試劑盒等。歡迎各界用戶來電或留言垂詢，無論您是親自下單，還是咨詢技術問題，我們將為您真誠服務。
更新時間：2024-06-25 
瀏覽次數：142
我的位置：
產品分類
上一篇：
地址：小行路158號
郵箱：
聯系人：聞經理
返回頂部