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明膠酶譜法檢測試劑盒,最多能檢測多少樣本呢?

更新時間:2024-10-11      瀏覽次數:59

產(chan)品(pin)名稱:明膠酶譜(pu)法檢測試劑盒(he)

產(chan)品規格:50T

儲存:按照說明書分別于4度和20度保存

有效期:6個月 

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簡介:

基(ji)(ji)質金屬蛋白(bai)(bai)酶(mei)(mei)(mei) (Matrix metalloproteinase ,MMP) 屬于(yu)(yu)金屬蛋白(bai)(bai)酶(mei)(mei)(mei)家族(zu)(zu),該家族(zu)(zu)由至少 20 個成(cheng)員(yuan)組(zu)成(cheng),并且(qie)已(yi)知參與(yu)細(xi)(xi)胞外基(ji)(ji)質蛋白(bai)(bai)的(de)(de)(de)(de)代(dai)謝。它(ta)們以(yi)無活性的(de)(de)(de)(de)酶(mei)(mei)(mei)原形式分泌,活化(hua)后能夠降解(jie)細(xi)(xi)胞外基(ji)(ji)質的(de)(de)(de)(de)膠原蛋白(bai)(bai),又(you)稱膠原酶(mei)(mei)(mei)。通(tong)(tong)過(guo)影響細(xi)(xi)胞外基(ji)(ji)質,膠原酶(mei)(mei)(mei)參與(yu)胚(pei)胎發(fa)育(yu)、形態發(fa)生、組(zu)織重(zhong)(zhong)塑(su)等過(guo)程,并參與(yu)炎癥、腫瘤、心血管、神經等許多疾病過(guo)程。血漿(jiang)與(yu)組(zu)織中(zhong)的(de)(de)(de)(de)MMP-2、MMP-9參與(yu)各種(zhong)生理與(yu)病理過(guo)程,其在臨床(chuang)診斷和(he)治療中(zhong)的(de)(de)(de)(de)意義日益受到重(zhong)(zhong)視。MMP 可通(tong)(tong)過(guo)酶(mei)(mei)(mei)譜法廣(guang)泛檢(jian)測。MMP2 & MMP9  Gelatin-Zymography Kit提供(gong)了一個簡單的(de)(de)(de)(de)酶(mei)(mei)(mei)譜電泳(yong)系統,用(yong)于(yu)(yu)檢(jian)測血液、體(ti)液、分泌物(wu)、細(xi)(xi)胞裂解(jie)液、細(xi)(xi)胞培養基(ji)(ji)等樣品中(zhong)的(de)(de)(de)(de)MMP2,MMP9酶(mei)(mei)(mei)譜及活性。

 

檢測原(yuan)理(li):

本(ben)(ben)試劑(ji)盒(he)采用(yong)凝(ning)膠(jiao)(jiao)(jiao)反相酶(mei)(mei)(mei)(mei)譜法(Zymography)檢(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)(ce)MMP-2、MMP-9 活性(xing)(xing)及(ji)(ji)(ji)其(qi)無活性(xing)(xing)前體酶(mei)(mei)(mei)(mei)原譜系。Zymography 是一種(zhong)廣為使用(yong)的(de)(de)(de)、基(ji)于SDS-PAGE 電(dian)(dian)泳和(he)反相凝(ning)膠(jiao)(jiao)(jiao)染(ran)色的(de)(de)(de)蛋白(bai)(bai)(bai)酶(mei)(mei)(mei)(mei)檢(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)(ce)方法,其(qi)靈(ling)敏度(du)可(ke)達1 nM,高于ELISA方法,其(qi)基(ji)本(ben)(ben)原理和(he)程序是:制備含(han)有(you)膠(jiao)(jiao)(jiao)原酶(mei)(mei)(mei)(mei)底(di)(di)物(wu)(wu)的(de)(de)(de)SDS-PAGE凝(ning)膠(jiao)(jiao)(jiao),含(han)蛋白(bai)(bai)(bai)酶(mei)(mei)(mei)(mei)的(de)(de)(de)樣(yang)品在此凝(ning)膠(jiao)(jiao)(jiao)中(zhong)(zhong)(zhong)進行電(dian)(dian)泳,電(dian)(dian)泳時(shi)(shi)SDS與樣(yang)本(ben)(ben)中(zhong)(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)MMP可(ke)逆性(xing)(xing)結合(he),導致MMP氫鍵和(he)疏水(shui)鍵破壞而不(bu)(bu)能發揮分解明(ming)膠(jiao)(jiao)(jiao)的(de)(de)(de)作用(yong)。電(dian)(dian)泳結束后取出凝(ning)膠(jiao)(jiao)(jiao)與酶(mei)(mei)(mei)(mei)反應(ying)Buffer孵(fu)育,MMP恢復活性(xing)(xing),凝(ning)膠(jiao)(jiao)(jiao)中(zhong)(zhong)(zhong)由于含(han)底(di)(di)物(wu)(wu)蛋白(bai)(bai)(bai)而被深染(ran),形成深色背(bei)景,但在有(you)蛋白(bai)(bai)(bai)酶(mei)(mei)(mei)(mei)條帶的(de)(de)(de)位置,蛋白(bai)(bai)(bai)酶(mei)(mei)(mei)(mei)將(jiang)降解凝(ning)膠(jiao)(jiao)(jiao)中(zhong)(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)底(di)(di)物(wu)(wu)蛋白(bai)(bai)(bai),因而不(bu)(bu)被染(ran)色而形成透亮區域,從而能同時(shi)(shi)指(zhi)示MMP-2、MMP-9 的(de)(de)(de)大小位置(酶(mei)(mei)(mei)(mei)譜)及(ji)(ji)(ji)活性(xing)(xing)。本(ben)(ben)試劑(ji)盒(he)提供MMP-2、MMP-9 特異蛋白(bai)(bai)(bai)底(di)(di)物(wu)(wu)及(ji)(ji)(ji)酶(mei)(mei)(mei)(mei)學反應(ying)緩沖液,可(ke)檢(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)(ce)少至0.1~0.5 μl 血液中(zhong)(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)MMP-2、MMP-9 酶(mei)(mei)(mei)(mei)譜及(ji)(ji)(ji)活性(xing)(xing),檢(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)(ce)靈(ling)敏度(du)~1nM。試劑(ji)盒(he)可(ke)進行25-50次標(biao)準(zhun)小膠(jiao)(jiao)(jiao)檢(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)(ce)(如(ru)果樣(yang)本(ben)(ben)MMP含(han)量高,孵(fu)育時(shi)(shi)間短,不(bu)(bu)用(yong)換液可(ke)最(zui)多50次),如(ru)果小膠(jiao)(jiao)(jiao)加樣(yang)孔為10~15個,則總計(ji)可(ke)最(zui)多檢(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)(ce)500~750個樣(yang)品。


如果小膠加(jia)樣孔為(wei)10~15個,則(ze)總計可(ke)最(zui)多檢測500~750個樣品。

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