產(chan)品名稱：大鼠腫瘤壞(huai)死(si)因子α（TNF-α）試劑盒

產品介紹：

本試(shi)劑盒用于體(ti)外定量檢測血清、血漿、組織(zhi)勻(yun)漿及相關液體(ti)樣(yang)本中大鼠腫瘤壞死因子α（TNF-α）的含(han)量。

有效期：6個月

保(bao)存條件：2-8℃

本試劑盒僅供科研使用(yong)，不得(de)用(yong)于臨床診(zhen)斷。

實(shi)驗原理(li)：

試(shi)劑盒采用雙抗(kang)體(ti)一步夾心法酶(mei)聯(lian)免疫吸附試(shi)驗（ELISA）。往預先(xian)包被(bei)大(da)鼠(shu)腫(zhong)瘤(liu)壞死(si)因子α（TNF-α）捕獲抗(kang)體(ti)的(de)(de)包被(bei)微孔(kong)中(zhong)，依次加入(ru)標(biao)本、標(biao)準(zhun)品(pin)、HRP標(biao)記的(de)(de)檢測(ce)抗(kang)體(ti)，經(jing)過(guo)溫育并洗(xi)滌。用底(di)物(wu)(wu)TMB顯色，TMB在(zai)過(guo)氧(yang)化(hua)(hua)物(wu)(wu)酶(mei)的(de)(de)催化(hua)(hua)下轉化(hua)(hua)成(cheng)藍色，并在(zai)酸的(de)(de)作(zuo)用下轉化(hua)(hua)成(cheng)最終的(de)(de)黃(huang)色。顏(yan)色的(de)(de)深淺和樣品(pin)中(zhong)的(de)(de)大(da)鼠(shu)腫(zhong)瘤(liu)壞死(si)因子α（TNF-α）呈正相(xiang)關。用酶(mei)標(biao)儀在(zai)450nm 波(bo)長下測(ce)定吸光度（OD 值），計算(suan)樣品(pin)濃(nong)度。

樣本處理及要求：

1. 血清：將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
2. 血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本，并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
3. 組織勻漿：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據實驗需要適當調整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。

4. 細胞培養物上清或其它生物標本：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

注：標本溶血會影(ying)響最后檢(jian)測結(jie)果，因(yin)此(ci)溶血標本不宜進(jin)行此(ci)項檢(jian)測。