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你知道單克隆抗體和多克隆抗體的區別嗎?

更新時間:2024-07-17      瀏覽次數:144

一、什么是抗體?
機體受抗原刺激后,由淋巴系統的細胞(主要是B淋巴細胞分化后的漿細胞)產生具有特異性免疫功能球蛋白,即抗體。抗體蛋白是一個由四條多肽鏈(兩條重鏈,兩條輕鏈)而組成的Y型分子。該Y型結構的兩個頂端處各含有一個抗體結合部位(paratope, 可以理解成是一把“鎖“)。每一種抗體結合部位可以特定地結合一種抗原表位(epitope, 可以理解成針對某一把“鎖"的 “鑰匙")。抗體結合表位與抗原表位這種特異對應關系是抗體與抗原高特異性結合的基礎。抗體在醫藥研發中有非常廣泛的應用。目前主要有兩大類的抗體:單克隆抗體(monoclonal antibody, Mabs)和多克隆抗體(polyclonal antibody, Pabs)


二(er)、單克(ke)隆抗體和多克(ke)隆抗體有(you)什么(me)區別(bie)?

1.定義的區別:

克隆:指無性繁殖,即由同一個祖先細胞分裂繁殖而形成的純細胞系,該細胞系中每個細胞的基因彼此相同。

單克隆抗體(monoclonal antibody,mAb):是由單一B細胞克隆產生的高度均一、僅針對某一特定抗原表位的抗體,稱為單克隆抗體。

多克隆抗體(polyclonal antibody, pAb):顧名思義,由多種抗原決定簇刺激機體,相應地就產生各種各樣的單克隆抗體,這些單克隆抗體混在一起就是多克隆抗體。簡言之,多克隆抗體就是用一種包含多種抗原決定簇的抗原免疫動物,刺激機體多個B細胞克隆產生針對多種抗原表位的不同抗體的混合物。


2.性質上的區別:

特(te)異性:

多克(ke)隆(long)抗體(ti)(ti)猶(you)如許(xu)多單(dan)(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)(ti)的(de)集合,它們(men)有的(de)特異(yi)性(xing)高,有的(de)特異(yi)性(xing)低(di),總體(ti)(ti)特異(yi)性(xing)符合正(zheng)態分布曲(qu)(qu)線(xian)的(de)形式,而其特異(yi)性(xing)的(de)總體(ti)(ti)表(biao)現也(ye)應處于統(tong)計學正(zheng)態曲(qu)(qu)線(xian)中位線(xian)(MID)的(de)水平。而單(dan)(dan)抗制備后續的(de)篩選過程,可去(qu)除大部分的(de)非(fei)特異(yi)抗體(ti)(ti),保留(liu)幾(ji)株特異(yi)性(xing)較(jiao)好的(de)單(dan)(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)(ti)。 

一般而(er)言,單(dan)克(ke)隆(long)抗(kang)體(ti)具有(you)更高的(de)(de)特(te)異性(xing)(xing)。多抗(kang)特(te)異性(xing)(xing)可通過生產(chan)環節(jie)比如使用(yong)(yong)高純度的(de)(de)免疫(yi)原,以(yi)及(ji)使用(yong)(yong)提純的(de)(de)靶點蛋白對多抗(kang)進(jin)行(xing)免疫(yi)親和層析純化等(deng)方法得以(yi)改(gai)進(jin)。經過免疫(yi)親和層析的(de)(de)多抗(kang)其(qi)總體(ti)特(te)異性(xing)(xing)將大大提升,與單(dan)抗(kang)相(xiang)比已相(xiang)差無幾。


交叉反應:

抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan)與(yu)(yu)(yu)(yu)抗(kang)(kang)體(ti)結(jie)合(he)的(de)(de)特(te)異性(xing),是指某一抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan)表(biao)(biao)(biao)位(wei)與(yu)(yu)(yu)(yu)相(xiang)應(ying)抗(kang)(kang)體(ti)結(jie)合(he)的(de)(de)特(te)異性(xing)。這種(zhong)結(jie)合(he)的(de)(de)分(fen)子機制是抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan)表(biao)(biao)(biao)位(wei)的(de)(de)空間(jian)結(jie)構(gou)與(yu)(yu)(yu)(yu)抗(kang)(kang)體(ti)分(fen)子超(chao)變區互補的(de)(de)結(jie)果。而交(jiao)叉反應(ying)是指兩種(zhong)抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan)分(fen)子表(biao)(biao)(biao)面存在有相(xiang)同(tong)或相(xiang)似的(de)(de)抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan)表(biao)(biao)(biao)位(wei)時,與(yu)(yu)(yu)(yu)同(tong)一種(zhong)抗(kang)(kang)體(ti)結(jie)合(he)的(de)(de)現象。因此,交(jiao)叉反應(ying)實質(zhi)上也是抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan)與(yu)(yu)(yu)(yu)抗(kang)(kang)體(ti)的(de)(de)特(te)異性(xing)結(jie)合(he)。

單克(ke)隆(long)抗體(ti)僅針(zhen)對目標抗原某一特定(ding)抗原表位(wei),特異(yi)性高,存在(zai)有(you)相同或相似的抗原表位(wei)幾(ji)(ji)率(lv)低,出現交叉反(fan)應(ying)的幾(ji)(ji)率(lv)也就低。

多(duo)克隆抗(kang)體針(zhen)對目標抗(kang)原多(duo)個抗(kang)原表位(wei),特(te)異性低,具有生物(wu)物(wu)理(li)多(duo)樣性,存在有相同或相似的(de)抗(kang)原表位(wei)幾率高(gao),出現(xian)交叉反應的(de)幾率也就較高(gao)。


假(jia)陽性:

根據抗(kang)(kang)體(ti)(ti)最核(he)心(xin)的(de)表位結合區域—互(hu)補決(jue)定(ding)區(Complementarity Determining Region,CDR)的(de)結構(gou),抗(kang)(kang)體(ti)(ti)通(tong)常可(ke)以緊密結合的(de)抗(kang)(kang)原(yuan)表面(mian)區域或表位面(mian)積很(hen)小,對于變性的(de)肽段(duan)約(yue)在(zai)4-8個(ge)Aa以內,以及5-7個(ge)單糖的(de)糖鏈或6-8個(ge)核(he)苷酸的(de)核(he)酸。通(tong)過肽段(duan)BLAST可(ke)以得知(zhi),小肽段(duan)序(xu)列相同(tong)的(de)情況將在(zai)很(hen)多不(bu)同(tong)蛋(dan)白上發生。這意味著單抗(kang)(kang)識(shi)別的(de)這個(ge)表位可(ke)能(neng)并不(bu)僅僅屬于靶標蛋(dan)白本身,也即意味著,即使利用(yong)純化抗(kang)(kang)原(yuan)蛋(dan)白進行了特異性篩選的(de)單克隆抗(kang)(kang)體(ti)(ti),當用(yong)其(qi)檢測(ce)復雜樣(yang)本時,也將面(mian)臨交叉(cha)反應或假陽性問題(ti)。


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