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產品介紹:
NRPB58——Ni-TED NUPharose FF Ni-TED NUPharose FF是金屬(shu)離子(zi)脫落率較低的一(yi)款(kuan)金屬(shu)螯合親和填料,配基為三羧甲基乙二胺(tris-carboxymethyl ethylene diamine,TED)基團,配位金屬(shu)離子(zi)為Ni2+。
本產品的TED配基(ji)與Ni2+形成(cheng)的五配位結構穩定(ding)性好,對(dui)螯(ao)(ao)合劑(ji)、還原劑(ji)、酸、堿等(deng)試劑(ji)有著(zhu)出色(se)的耐受性,可在10mM EDTA、100 mM β-ME或50 mM DTT等(deng)條件下(xia)正常使用,可在pH=1或pH=14的條件下(xia)處理24h后(hou)保(bao)持出色(se)的色(se)譜性能,也長期保(bao)存在10mM NaOH 中,洗(xi)脫液(ye)中需要的咪唑(zuo)濃度相對(dui)其(qi)他金屬螯(ao)(ao)合填(tian)料(liao)更(geng)低。因(yin)此(ci),Ni-TED NUPharose FF適合用于下(xia)列純(chun)化體系:
目標蛋白中含半(ban)胱(guang)an酸或者對氧敏感(gan),需(xu)要添加 β-ME 或 DTT 時;
目標蛋(dan)白中含半胱(guang)an酸且有金(jin)屬反應性,需要添(tian)加(jia) DTT 和 EDTA 時
目標(biao)蛋(dan)白(bai)容易被(bei)金屬蛋(dan)白(bai)酶水解,需要添加(jia) EDTA 時;
目標蛋(dan)白對高濃度咪唑(zuo)敏感(gan),需要降低洗脫液中咪唑(zuo)濃度時;
真(zhen)核(he)細(xi)胞(bao)表達體(ti)系中本(ben)身含 β-ME 或 EDTA 的情況;
對產物(wu)中金屬離子含量要求嚴格時(shi)。
Ni-TED NUPharoseFF的配基偶聯工藝經過(guo)了特(te)殊(shu)的設計,使得成品的壓力/流(liu)速特(te)性(xing)(xing)得到(dao)大(da)(da)幅提升,最大(da)(da)流(liu)速和(he)耐(nai)壓分別(bie)超過(guo)1500cm/h和(he)0.5MPa。通過(guo)配基修飾過(guo)程(cheng)的優化,本(ben)產(chan)品在親和(he)力(載量(liang))和(he)特(te)異性(xing)(xing)(選擇性(xing)(xing))之(zhi)間取得良(liang)好的均(jun)衡:對帶組an酸標簽蛋白的結合量(liang)大(da)(da)于(yu)20 mg/mL的同(tong)時,一步純(chun)化后(hou)樣品純(chun)度可達90%以上。
產品特(te)點與技術指標:
產品名(ming)稱(cheng) | 三羧甲基乙二胺-瓊脂糖 |
基質 | 6%交聯瓊脂糖(tang) |
配基 a | 三(san)羧(suo)甲基乙二胺,螯合~60 μmol Ni2+/mL |
粒徑范圍 b | 45~165 μm |
平均粒徑 | ~90 μm |
動態(tai)結(jie)合載(zai)量 c | ≥20 mg/mL 帶組-氨-酸標簽(qian)蛋白 |
推薦(jian)工作流速(su) d | 60~300 cm/h |
最大(da)流速(su)與壓力 e | >1500 cm/h ,0.5 MPa |
使用 pH | 3~12(推薦的工作 pH),3~12(長期(qi)(qi)穩(wen)定);2~14(短期(qi)(qi)穩(wen)定) |
化學穩(wen)定性(xing) | 1)純化緩沖液(ye):常用的水相緩沖液(ye),可含有 10 mM EDTA ,100 mM β-ME 或 50 mM DTT。 2)在位清洗(CIP)處理:1 M NaOH 、1~2 M NaCl 、70%乙(yi)醇、 30%異丙醇,0.1~0.5%非離子型(xing)表面活(huo)性劑。 3)在下述(shu)溶液中處(chu)理(li)特定時間,填(tian)料性能保(bao)持穩定:10 mM NaOH (長期(qi))、0.1 M 鹽(yan)酸(24 h)、6 M 鹽(yan)酸胍(gua)(24 h)。 |
儲存與(yu)運輸 | 20%乙醇,2~30 ℃ |
南京億迅生物科技(ji)有限(xian)公(gong)司出品的(de)各(ge)種蛋白(bai)類產(chan)品,產(chan)品質量穩定,價格實(shi)惠(hui),在國(guo)內各(ge)科(ke)研院所和(he)高校擁(yong)有良(liang)好的(de)品譽。
該(gai)類產品還有:瓊脂(zhi)(zhi)糖(tang)(tang)微(wei)球(qiu)-重(zhong)組耐(nai)堿蛋(dan)白A親和(he)填(tian)料(liao),含亞氨基(ji)二(er)乙(yi)酸-瓊脂(zhi)(zhi)糖(tang)(tang),次氮(dan)基(ji)三(san)(san)乙(yi)酸-瓊脂(zhi)(zhi)糖(tang)(tang),次氮(dan)基(ji)三(san)(san)乙(yi)酸-交聯瓊脂(zhi)(zhi)糖(tang)(tang),4%交聯瓊脂(zhi)(zhi)糖(tang)(tang)-重(zhong)組耐(nai)堿蛋(dan)白A 親和(he)填(tian)料(liao)等。
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三羧甲基乙二胺-瓊脂糖