產(chan)品名(ming)稱：小鼠白細胞介素1β（IL-1β）ELISA試劑盒

產(chan)品規格：96T，48T

有效期：6個月(yue)

保(bao)存條(tiao)件：2-8℃

本試劑盒用于體外定量檢測(ce)血清(qing)、血漿、組織勻漿及相關液體樣(yang)本中(zhong)小鼠白細(xi)胞介素1β（IL-1β）的含(han)量。

本試(shi)劑盒僅供科研使用(yong)，不得用(yong)于臨床診斷

實驗原理:

試劑盒采(cai)用(yong)(yong)雙抗體一步夾(jia)心法酶(mei)聯免疫(yi)吸(xi)附試驗（ELISA）。往預先(xian)包(bao)被(bei)小(xiao)鼠白(bai)細(xi)胞(bao)介(jie)(jie)素1β（IL-1β）捕獲抗體的(de)(de)包(bao)被(bei)微孔中(zhong)，依次加(jia)入標本、標準品、HRP標記的(de)(de)檢測抗體，經(jing)過溫育并洗滌。用(yong)(yong)底(di)物TMB顯色(se)(se)，TMB在過氧化(hua)(hua)物酶(mei)的(de)(de)催化(hua)(hua)下轉(zhuan)化(hua)(hua)成藍(lan)色(se)(se)，并在酸的(de)(de)作用(yong)(yong)下轉(zhuan)化(hua)(hua)成最終的(de)(de)黃(huang)色(se)(se)。顏色(se)(se)的(de)(de)深淺和樣品中(zhong)的(de)(de)小(xiao)鼠白(bai)細(xi)胞(bao)介(jie)(jie)素1β（IL-1β）呈(cheng)正相(xiang)關(guan)。用(yong)(yong)酶(mei)標儀在450nm 波長(chang)下測定吸(xi)光度（OD 值(zhi)），計算樣品濃度。

樣(yang)本處理及要求:

1.  血清：將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
2.  血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本，并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
3.  組織勻漿：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果），稱重后將組織，剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據實驗需要適當調整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。

4.  細胞培養物上(shang)(shang)清或(huo)其它生物標本(ben)：請(qing)1000×g離(li)心(xin)20分鐘(zhong)，取上(shang)(shang)清即可(ke)檢測，或(huo)將(jiang)上(shang)(shang)清置于(yu)-20℃或(huo)-80℃保存，但應避免反復凍融。

注：標本溶(rong)血會影響最(zui)后(hou)檢測(ce)結果，因(yin)此溶(rong)血標本不宜進(jin)行此項檢測(ce)。

需要而未提供(gong)的試(shi)劑(ji)和器材:

1. 酶標儀（450nm）

2. 高精(jing)度加(jia)樣器(qi)及(ji)槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒溫(wen)箱(xiang)

4. 蒸餾水或去離(li)子水

試劑盒組成:

備(bei)注：

1.  標(biao)準品濃度依次(ci)為(wei)：120、60、30、15、7.5、3.75 pg/ml

2.  經(jing)過(guo)大量(liang)正常標(biao)本(ben)檢(jian)(jian)驗(yan)，標(biao)本(ben)的正常濃度(du)值均在(zai)試劑盒提供的檢(jian)(jian)測范圍內，實驗(yan)過(guo)程中直接取50μL樣本(ben)上樣即(ji)可(ke)。當有部分樣本(ben)值超過(guo)最大標(biao)準(zhun)品濃度(du)時，可(ke)用(yong)樣本(ben)-稀釋液將標(biao)本(ben)進(jin)行適當稀釋后再進(jin)行實驗(yan)。

注(zhu)意事(shi)項:

1. 嚴格按照(zhao)規(gui)定的時(shi)間和(he)溫度進行溫育以保證(zheng)準確結果。所有試(shi)(shi)劑(ji)(ji)都必須在使用(yong)前達(da)到室溫20-25℃。使用(yong)后立即冷(leng)藏(zang)保存試(shi)(shi)劑(ji)(ji)。

2. 洗板不(bu)正(zheng)確可(ke)以導致不(bu)準確的結果(guo)。在加入底(di)物前確保盡量吸干孔(kong)內液體。溫育(yu)過程中不(bu)要(yao)讓(rang)微孔(kong)干燥掉。

3. 消(xiao)除板底殘留的液體和手指印，否則(ze)影(ying)響OD值。

4. 底(di)物(wu)顯(xian)色(se)液應呈(cheng)無色(se)或很淺的顏色(se)，已經變藍的底(di)物(wu)液不能(neng)使用(yong)。

5. 避免試劑和標本的交叉污(wu)染(ran)以免造成錯誤結果。

6. 在(zai)儲存和(he)溫育時避免強光直接照射。

7. 平衡至室溫后再打開密(mi)封袋以防水滴凝聚(ju)在冷板條上。

8. 任(ren)何反應(ying)試(shi)劑(ji)不能接觸(chu)漂(piao)(piao)白溶(rong)劑(ji)或(huo)漂(piao)(piao)白溶(rong)劑(ji)所散(san)發的強烈氣體。任(ren)何漂(piao)(piao)白成分都會破(po)壞(huai)試(shi)劑(ji)盒(he)中反應(ying)試(shi)劑(ji)的生物活性。

9. 不(bu)能使(shi)用(yong)過期產品。

10. 如果可能傳播疾病(bing)，所有的樣品(pin)都應(ying)管理(li)好，按(an)照規定的程(cheng)序(xu)處理(li)樣品(pin)和檢(jian)測裝置。

試劑準(zhun)備(bei):

試劑盒從(cong)冷藏(zang)環境中取(qu)出應在室溫平衡后(hou)方可(ke)使(shi)用(yong)。

20×洗(xi)滌(di)緩沖(chong)液(ye)的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗(xi)滌(di)緩沖(chong)液(ye)加19份蒸餾水。

操作步驟:

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋(dai)中取出所需(xu)板條，剩(sheng)余板條用自封袋(dai)密封放回4℃。

2.  設(she)置標準(zhun)品孔和樣本孔，標準(zhun)品孔各(ge)加不(bu)同濃度的標準(zhun)品50μL；

3.  樣本孔(kong)(kong)中加(jia)入待測樣本50μL；空白孔(kong)(kong)不加(jia)。

4.  除(chu)空白(bai)孔(kong)外，標(biao)準品孔(kong)和(he)樣本(ben)孔(kong)中每孔(kong)加(jia)入辣根過氧化物酶（HRP）標(biao)記的檢(jian)測抗體(ti)100μL，用(yong)封板膜封住反應孔(kong)，37℃水浴鍋或恒(heng)溫箱溫育60min。

5.  棄去(qu)液(ye)體(ti)(ti)，吸(xi)水紙(zhi)上(shang)拍干(gan)，每孔加(jia)滿洗(xi)滌液(ye)（350μL），靜置(zhi)1min，甩去(qu)洗(xi)滌液(ye)，吸(xi)水紙(zhi)上(shang)拍干(gan)，如此重復洗(xi)板5次（也可用洗(xi)板機洗(xi)板）。

6.  每孔加入底物A、B各(ge)50μL，37℃避光孵育(yu)15min。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處(chu)測定各孔的OD值。

實驗結果計算:

以所測標準品的(de)OD值(zhi)(zhi)為橫坐標，標準品的(de)濃(nong)度(du)值(zhi)(zhi)為縱坐標，在(zai)坐標紙上或用(yong)相關軟件繪(hui)制標準曲(qu)線(xian)，并得(de)到(dao)直線(xian)回歸方程，將樣(yang)品的(de)OD值(zhi)(zhi)代入方程，計算(suan)出樣(yang)品的(de)濃(nong)度(du)。

試劑盒性能:

1.  檢測范圍(wei)：3.75 pg/ml – 120 pg/ml。

2.  靈敏度(du): 蕞低(di)檢測濃(nong)度(du)小于0.1 pg/ml。

3.  特異性：不與(yu)其(qi)它(ta)可溶性結構類似物交叉反應。

4.  重(zhong)復(fu)性：板內變異(yi)系數小(xiao)于10% ，板間變異(yi)系數小(xiao)于15% 。

說(shuo)明:

由于現(xian)有條件(jian)及科學技術水平(ping)尚(shang)不能(neng)對所(suo)有供貨商提供的所(suo)有原料進(jin)行全(quan)面的鑒定與分析，本產品可(ke)能(neng)存在(zai)一定的質量技術風(feng)險。

1. 最終(zhong)的(de)實驗(yan)(yan)結果(guo)與試劑的(de)有效(xiao)性、實驗(yan)(yan)者的(de)相關操作(zuo)以及(ji)當時的(de)實驗(yan)(yan)環境密切相關，請務必(bi)準(zhun)備充足的(de)標本(ben)備份(fen)。

2. 不同批次(ci)的同一產品可(ke)能會有(you)少(shao)許差別，如：檢測限、靈敏度(du)以及顯色時間等，請(qing)依據試劑盒內說(shuo)明(ming)書進行實驗操作，網站電(dian)子版說(shuo)明(ming)書僅作參考。

3. 只(zhi)有全部使用(yong)本試劑(ji)盒(he)配(pei)套試劑(ji)才能保證檢(jian)測(ce)效果(guo)，不能混用(yong)其(qi)他制造商(shang)的產品。只(zhi)有嚴格遵(zun)守本試劑(ji)盒(he)的實驗說明才會得到(dao)最佳(jia)的檢(jian)測(ce)結果(guo)。

4. 本(ben)公司只(zhi)對試劑盒本(ben)身負(fu)責(ze)，不對因(yin)使(shi)用(yong)該(gai)試劑盒所造成(cheng)的樣本(ben)消耗負(fu)責(ze)，請使(shi)用(yong)者使(shi)用(yong)前(qian)充分考慮到樣本(ben)的可能使(shi)用(yong)量(liang)，預留充足的樣本(ben)。

5. 使用化(hua)學(xue)裂解液(ye)制備的(de)組織勻漿或細胞提取液(ye)可能會由于某些化(hua)學(xue)物質的(de)引入導致(zhi)ELISA實(shi)驗(yan)結果偏差。

6. 若樣本為細胞(bao)培養上(shang)清，因該(gai)類樣本干擾因素較(jiao)多，如：細胞(bao)狀態、細胞(bao)數量、采樣時間(jian)等，所(suo)以(yi)可能存在檢測(ce)不出的(de)情況。

7. 某些天然蛋(dan)(dan)白或重組(zu)蛋(dan)(dan)白，包括原(yuan)核(he)及(ji)真(zhen)核(he)重組(zu)蛋(dan)(dan)白，可(ke)能因(yin)為與(yu)本產品所(suo)使用的檢測(ce)抗(kang)體及(ji)捕獲(huo)抗(kang)體不匹配(pei)，而不被檢測(ce)出。

小鼠白細胞介素1β（IL-1β）ELISA試劑盒

南京億迅生物科技有限(xian)公(gong)司出品的各類ELISA試劑盒。產品質量穩定，價格實惠，在國內各科研院所和高校擁有良好的品譽。

該類產品還有大(da)(da)鼠(shu)白細胞(bao)介素1β(IL-1β)ELISA試(shi)(shi)劑盒，大(da)(da)鼠(shu)白細胞(bao)介素4(IL-4)ELISA試(shi)(shi)劑盒，大(da)(da)鼠(shu)白細胞(bao)介素5(IL-5)ELISA試(shi)(shi)劑盒，小鼠(shu)沉默調節蛋(dan)白1(SIRT1)ELISA試(shi)(shi)劑盒等。

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